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Expérience

1. Extraction des pigments de deux types de feuilles ( prunus et plante verte )

On broie des feuilles d'une plante bien verte dans de l'acétone (ou de l'alcool à 95°) à l’aide d’un mortier, jusqu’à l’obtention d'une solution bien verte, puis on filtre. Cette expérience permet de recueillir une solution très propre permettant de réaliser un spectre ou une chromatographie.

De même, on broie des feuilles de prunus.

 Filtration après broyage des deux types de feuilles

2. Séparation par chromatographie

Sur une ligne située à 1 cm du bas d'une bande de papier à chromatographie, on écrase un morceau de feuille avec un agitateur (en répétant l'opération plusieurs fois pour obtenir une petite tâche très colorée). La bande de papier est placée dans une cuve contenant un mélange de solvants organiques (cyclohexane,5%, éther de pétrole, 85%, acétone, 10%). Le solvant monte par capillarité dans la bande de papier et entraîne les différents pigments solubles dans les solvants organiques. Ils se séparent progressivement en fonction de leur vitesse de migration qui dépend de leur solubilité différentielle dans le solvant (phase mobile) et de leur affinité pour le support de chromatographie (phase stationnaire).

 

Durant la migration, il a fallu recouvrir les tubes contenant les deux supports des chromatographies avec des caches, 

évitant ainsi la pénétration de la lumière.

Chromatographies terminées

On observe plusieurs taches correspondant à des pigments verts (chlorophylles a et b) et jaunes (xanthophylles et carotènes).

            3. Spectres d'absorption des différents pigments d'une feuille

Enfin, nous avons réalisé un spectre de nos deux solutions ( verte et orange foncée obtenues après filtration.

Solutions obtenues après filtration

 Le spectre a été réalisé avec un spectroscope. Les résultats sont présents ci-dessous :

Le mélange de pigments bruts (en haut) absorbe principalement dans le bleu (< 450 nm) et le rouge (650-670 nm).

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